《一騎當千GreatGuardians》延續前作劇情，以中國三國時代為背景的南陽學院與成都學院結盟對抗魔王曹操孟德，并在赤壁之戰后迎來短暫和平。孫策伯符與呂蒙子明、周瑜公瑾為海外旅行在中華街飯店打工時，意外與成都學院頭領劉備玄德相遇并締結新盟約。然而山中突現的雷鳴異象打破了平靜——身著西裝馬尾的神秘女斗士與軍神關羽云長展開激烈對決，其壓倒性實力令人側目。正當眾人疑惑之際，孫策伯符身邊突然出現名為孫權仲謀的可愛少女，作為其妹妹的身份引發關注。與此同時，前作中戰敗的呂布奉先竟在本季復活重返戰場。作品通過斗士們被宿命驅動的羈絆與沖突，繼續展現格斗熱血物語。